Aparatura

Mikroskop odwrócony Delta Optical IB-100 LED

Mikroskop odwrócony Delta Optical IB-100 LED wykorzystywany jest w Pracowni do obserwacji materiału biologicznego w polu jasnym i kontraście fazowym. Przyrząd ten wyposażony jest w zestaw do epifluorescencji, który zawiera filtry B, G, U oraz V, a także obiektywy planachromatyczne oraz obiektywy kontrastu fazowego. Aparatura wykorzystywana jest między innymi do obrazowania hodowli komórkowych 2D i 3D oraz testów typu live-dead i histonu γ-H2AX.

 

Źródło powierzchniowe ²⁴¹Am

W laboratorium radiobiologicznym do napromieniania komórek nowotworowych glejaka wykorzystywane jest powierzchniowe źródło promieniotwórcze ²⁴¹Am o średnicy 50 mm oraz aktywności 1,96 MBq.  Aktywna część źródła, która składa się z proszku czystego złota oraz AmO₂ w stosunku 1:0,0425, pokryta jest warstwą złota. Podczas napromieniania materiału komórkowego źródło jest zamocowane do pokrywki szalki Petriego. W celu zabezpieczenia źródła przed uszkodzeniami jest ono pokryte dodatkowo 6 μm warstwą folii Mylar.

 

INKUBATOR NUAIRE

Inkubator NUAIRE to jedno z podstawowych urządzeń wykorzystywanych w laboratoriach biologicznych, biotechnologicznych oraz medycznych, które pozwala na precyzyjne utrzymanie stałych warunków środowiskowych. Jest niezastąpiony w pracy wymagającej kontroli parametrów takich jak: 

1. Temperatura – pozwala na precyzyjne dostosowanie warunków termicznych do wymagań konkretnego eksperymentu. Optymalny zakres temperatury zależy od rodzaju hodowanych komórek lub mikroorganizmów. Najczęściej utrzymywana jest temperatura około 37°C, odpowiadająca warunkom ludzkiego organizmu. 
2. Wilgotność – w celu uniknięcia wysychania komórek oraz utrzymnia prawidłowego mikroklimatu wewnątrz urządzenia konieczne jest regularne dolewanie wody.Odpowiedni poziom wilgotności uzyskuje się za pomocą specjalnej tacki z wodą umieszczonej wewnątrz inkubatora.
3. Stężenie dwutlenku węgla (CO₂) – w inkubatorze wykorzystywanym w naszym laboratorium stężenie CO₂ wynosi 5%. Takie warunki odwzorowują środowisko panujące w tkankach organizmu, co jest szczególnie istotne dla hodowli komórek eukariotycznych wymagających stabilnego pH pożywek (jest ono kontrolowane właśnie za pomocą CO₂). 

Dzięki tym funkcjom inkubator znajduje zastosowanie w: 

• hodowli komórek zwierzęcych, roślinnych, bakteryjnych i grzybów, 
• przeprowadzaniu reakcji biochemicznych wymagających stabilnych warunków środowiskowych, 
• badaniach związanych z terapiami komórkowymi, testami leków czy analizą toksyczności substancji chemicznych. 

Precyzyjna kontrola środowiska w inkubatorze jest kluczowa dla zapewnienia odpowiedniego wzrostu komórek i dokładności wyników eksperymentalnych. 

KOMORA LAMINARNA NUAIRE

 

Komora laminarna to zaawansowane urządzenie laboratoryjne służące do pracy w warunkach sterylnych. Przestrzeń robocza komory jest zaprojektowana tak, aby zapewnić ochronę zarówno próbki, jak i użytkownika przed kontaminacją. 

Sterylność w komorze osiągana jest dzięki systemowi filtrów HEPA (ang. High-Efficiency Particulate Air), które usuwają z powietrza cząsteczki i mikroorganizmy. Powietrze dostarczane do przestrzeni roboczej ma klasę czystości odpowiadającą normom dla pomieszczeń czystych, co jest kluczowe w hodowli komórek i przygotowywaniu materiałów biologicznych. 

Przed rozpoczęciem pracy w komorze należy przestrzegać następujących procedur: 

1. Dokładnie zdezynfekować wszystkie narzędzia i materiały za pomocą roztworu etanolu, aby zapobiec wprowadzeniu zanieczyszczeń do sterylnego środowiska. 
2. Zadbać o czystość własnych rąk i odzieży ochronnej – korzystać z rękawiczek, fartuchów i masek. 
3. Upewnić się, że przepływ powietrza w komorze jest prawidłowy i nie zakłóca go np. ustawienie materiałów blokujących wylot filtrów. 

Komora laminarna jest niezastąpiona w pracy z materiałami biologicznymi, szczególnie podczas operacji takich jak: 

• siew komórek na pożywki, 
• izolacja RNA i DNA, 
• przygotowywanie próbek do analiz molekularnych. 

Licznik komórek LUNA-II

Pracownia wyposażona jest w automatyczny licznik komórek LUNA-II^TM firmy Logos Biosystems, który umożliwia przeprowadzenie dokładnego i powtarzalnego liczenia komórek w polu jasnym. Licznik pozwala na przygotowanie niestandardowych protokołów liczenia. W celu ułatwienia weryfikacji wyników stosowany jest kod kolorystyczny, który umożliwia rozróżnienie komórek żywych (kolor zielony) oraz komórek martwych (kolor czerwony). Wyniki pomiaru liczby komórek można odczytać bezpośrednio na ekranie licznika lub zapisać je w postaci raportów ze zdjęciami.

Do barwienia komórek wykorzystywany jest barwnik Trypan blue (błękit trypanu), który stosowany jest do ilościowego oznaczania żywych komórek poprzez znakowanie wyłącznie komórek, które są martwe. Metoda ta jest skuteczna ponieważ żywe komórki mają nienaruszoną błonę komórkową, przez którą nie może przeniknąć błękit trypanu. W przypadku martwych komórek barwnik ten przenika błonę komórkową, która jest naruszona i dostaje się do cytoplazmy.